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松材线虫Bx-HSF-1转录激活活性研究

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[目的]通过研究松材线虫热激转录因子Bx-HSF-1转录激活活性及其靶基因在松材线虫7个虫态(龄)的表达量,揭示Bx-HSF-1在松材线虫生长发育过程中的具体功能.[方法]构建pGBKT7-Bx-hsf-1重组质粒,转化酵母AH109菌株,验证Bx-HSF-1的转录激活活性.应用RNA干扰(RNAi)和转录组技术鉴定Bx-hsf-1基因沉默后松材线虫差异表达基因.对差异表达基因进行基因互作分析,筛选出受Bx-HSF-1调控的靶基因.应用RT-qPCR鉴定5条靶基因在J2、DJ3、DJ4、J3、J4、雌成虫和雄成虫共7种虫态(龄)中的表达量.[结果]转入pGBKT7-Bx-hsf-1重组质粒的酵母AH109菌株能够在SD/-Trp和SD/-Trp/-His/-Ade培养基上正常生长,并且在SD/-Trp/-His/-Ade+X-α-gal培养基中显蓝色,表明Bx-HSF-1能够激活下游报告基因表达,具有转录激活活性.通过荧光显微观察及RT-qPCR验证,RNAi处理12 h后靶向siRNA可顺利导入松材线虫细胞,且有效抑制Bx-hsf-1的表达.RNAi处理后转录组数据分析共鉴定到110条差异表达基因,其中86条下调表达.基因互作分析筛选到5条靶基因(Bx-daf-21、Bx-hsp-1、Bx-hsp-70、Bx-sti和Bx-cdc),通过RT-qPCR对这5条靶基因在7种虫态(龄)中的表达量进行分析.在7种虫态(龄)中,Bx-daf-21与Bx-hsf-1的表达量变化趋势一致,Bx-hsp-70与Bx-hsf-1表达量变化趋势相反,Bx-sti和Bx-hsp-1与Bx-hsf-1表达量变化趋势无相关性.在DJ3中,Bx-cdc与Bx-hsf-1表达量变化趋势相反.[结论]松材线虫Bx-HSF-1具有转录激活功能,通过转录调控参与松材线虫各虫态(龄)发育过程.
Transcriptional activity of the Bx-HSF-1 in Bursaphelenchus xylophilus ( Aphelenchida:Aphelenchoididae)

张瑞芝、姜生伟、吴昊、陈俏丽、李丹蕾、王峰

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黑龙江省外来林木病虫害监测与防控重点实验室,东北林业大学林学院,黑龙江 哈尔滨 150040

辽宁省林业和草原局有害生物防治检疫工作站,辽宁 沈阳 110001

辽宁省危险性林业有害生物防控重点实验室,沈阳工学院,辽宁 沈阳 113122

森林生态系统可持续经营教育部重点实验室,东北林业大学林学院,黑龙江 哈尔滨 150040

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松材线虫 热激转录因子 转录激活活性 虫龄

国家自然科学基金辽宁省重点研发计划

319716562019JH2/10200001

2022

10.12302/j.issn.1000-2006.202102019

南京林业大学学报(自然科学版)
南京林业大学

南京林业大学学报(自然科学版)

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：1.012
ISSN：1000-2006
年,卷(期)：2022.46(4)
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