[目的]本文旨在研究不结球白菜BrCDF1基因的功能,验证其与CO启动子之间的调控关系,以及其在植物抽薹开花中所起的作用.[方法]以不结球白菜‘苏州青’为材料,采用酵母单杂交技术,验证BrCDF1转录因子与CO启动子是否能够结合;构建过表达载体pEarlyGate101-BrCDF1,利用农杆菌介导法将过表达载体导入拟南芥中,筛选阳性苗,同时对阳性苗进行Western blot检测,观察转基因植株的表型变化;采用RT-qPCR技术,检测BrCDF1、CO、FT基因在转基因和野生型植株中不同时间点的相对表达量.[结果]酵母单杂交和β-半乳糖苷酶试验分析结果显示,BrCDF1转录因子和CO启动子之间具有较高的结合活性.Western blot检测结果表明:转基因拟南芥植株中的BrCDF1蛋白成功表达.RT-qPCR结果表明,BrCDF1基因在转基因植株中的相对表达量比野生型植株高;CO、FT基因在转基因植株中的相对表达量比野生型低,同时BrCDF1过表达植株较野生型开花晚.[结论]BrCDF1转录因子能与CO启动子结合,从而抑制CO、FT基因的表达,进而影响不结球白菜光周期开花途径.
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