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刚地弓形虫热休克蛋白21体外条件下对小鼠巨噬细胞功能的影响

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[目的]本试验旨在探究刚地弓形虫热休克蛋白21(TgHSP21)在体外对小鼠巨噬细胞系(Ana-1)功能的调节作用.[方法]构建重组表达载体pET-32a/TgHSP21,获得重组蛋白TgHSP21(rTgHSP21).用免疫荧光抗体试验(IFA)验证rTgHSP21在体外与Ana-1细胞的结合情况.Ana-1细胞分别用不同质量浓度(5、10、20、40、80μg·mL-1)的rTgHSP21处理后,采取细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖情况,应用Transwell细胞小室检测细胞趋化情况,应用流式细胞术检测Ana-1细胞凋亡和吞噬能力.分别用总一氧化氮(NO)试剂盒和细胞因子ELISA试剂盒检测Ana-1细胞的NO和肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素12(IL-12)、IL-6、IL-1β的分泌量.[结果]成功获得纯化的rTgHSP21,其具有与Ana-1细胞结合的能力.5和10μg·mL-1的rTgHSP21均显著促进Ana-1细胞的增殖,各个浓度的rTgHSP21均显著促进细胞凋亡和吞噬能力.80μg·mL-1 rTgHSP21明显促进Ana-1细胞分泌NO.在不同浓度rTgHSP21作用下,细胞因子IL-6和TNF-α的表达量均明显上升,而其质量浓度为10、20、40和80μg·mL-1时IL-12的分泌被抑制.此外,rTgHSP21显著抑制了Ana-1细胞的迁移能力.[结论]TgHSP21能够与Ana-1细胞结合并在体外条件下调节Ana-1细胞的增殖、吞噬、凋亡、迁移及分泌.
Effects of Toxoplasma gondii heat shock protein 21 on the function of mouse macrophage in vitro

李纯静、周天缘、于正青、储稳、徐立新、宋小凯、严若峰、李祥瑞

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南京农业大学动物医学院/教育部动物卫生与食品安全国际联合研究实验室,江苏 南京210095

弓形虫 热休克蛋白21 小鼠巨噬细胞系 免疫功能

家畜疫病病原生物学国家重点实验室(中国农业科学院兰州兽医研究所)开放课题资助江苏省高等学校重点学科项目( PAPD)

2021

10.7685/jnau.201912025

南京农业大学学报
南京农业大学

南京农业大学学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.939
ISSN：1000-2030
年,卷(期)：2021.44(1)
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