首页|鸡胚原代肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离培养与鉴定

鸡胚原代肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离培养与鉴定

Isolation,culture and identification of primary alveolar type Ⅱepithelial cells from chicken embryo

扫码查看
原文链接
  • 国家科技期刊平台
  • NETL
  • NSTL
  • 万方数据
  • 维普
[目的]本试验旨在建立一套稳定的鸡肺泡Ⅱ型上皮细胞分离、纯化和培养技术,为深入研究鸡舍空气污染物对鸡肺泡功能影响提供体外研究模型.[方法]采用Ⅰ型胶原酶对16日龄鸡胚的肺组织进行消化,经过差速离心和差速贴壁法分离细胞,采用鸡免疫球蛋白G(IgG)免疫吸附法纯化细胞,再利用免疫荧光检测和碱性磷酸酶进行细胞鉴定.[结果]培养18～24 h细胞伸展贴壁,细胞为多边形,呈岛屿状生长;培养24～72 h,细胞增殖代谢旺盛,胞核明显,胞浆丰富,细胞之间逐渐连接成单层;培养72 h后,细胞内颗粒物减少,细胞形态改变.免疫荧光检测可见上皮细胞标志物细胞角蛋白19(cytok-eratin-19,CK19)的表达,碱性磷酸酶染色可见胞浆内出现弥散的红色或红棕色颗粒物.[结论]该方法是一种有效的鸡肺泡Ⅱ型上皮细胞分离、纯化和培养的技术,细胞产量高,纯度大,能够满足一般的体外研究.

郗蒙雪、戴鹏远、沈丹、李春梅

展开 >

南京农业大学动物科技学院/南京农业大学家畜环境控制与智慧生产研究中心,江苏 南京210095

肺泡Ⅱ型上皮细胞 原代细胞培养 分离 鉴定 鸡胚

国家自然科学基金国家自然科学基金国家重点研发计划项目

31772648320727812016YFD0500505

2021

10.7685/jnau.202003005

南京农业大学学报
南京农业大学

南京农业大学学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.939
ISSN：1000-2030
年,卷(期)：2021.44(2)
  • 7