摘要
[目的]本文旨在研究紫菜薹BrbHLH49基因在花青素合成中的功能.[方法]以紫菜薹为材料,通过同源克隆获得BrbHLH49基因全长序列,并与其他物种中的同源序列进行进化树分析;构建pEarlyGate101-BrbHLH49-YFP载体并转化导入烟草叶片中,研究BrbHLH49蛋白的亚细胞定位;采用荧光定量PCR(RT-qPCR)技术分析BrbHLH49基因在紫菜薹和'四九菜心'('CX-49')不同组织中的表达情况,同时分析野生型和35S:BrbHLH49-YFP转基因拟南芥中花青素合成相关基因的表达.[结果]BrbHLH49基因含有1431 bp开放阅读框,编码476个氨基酸,其编码的蛋白定位于细胞核中.在进化过程中BrbHLH49编码的氨基酸序列与甘蓝型油菜和野甘蓝(原变种)同源性最高,亲缘关系最近.RT-qPCR结果表明,紫菜薹的薹和叶中BrbHLH49相对表达量均显著高于'CX-49',且BrbHLH49转基因拟南芥植株中花青素合成相关基因的表达量显著高于野生型.[结论]BrbHLH49蛋白定位于细胞核中.BrbHLH49基因在紫菜薹的薹和叶中高表达,且拟南芥中过表达该基因能显著提高花青素的合成.
基金项目
江苏省博士后科研资助计划项目(2020Z237)
安徽省重点研究与开发计划项目(202004a06020062)
江苏省农业科技自主创新资金项目(CX193122)
江苏高校优势学科建设工程资助项目(PAPD)