摘要
[目的]本试验旨在研究猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)流行毒株JS2013诱导Vero细胞凋亡的相关机制.[方法]用添加5μg·mL-1胰酶的Vero细胞成功扩增PEDV JS2013毒株后,采用倒置显微镜、间接免疫荧光、流式细胞术、Hoechst染色、细胞活性计数(CCK-8)以及Western blot等方法,检测Vero细胞感染JS2013后产生的病变、凋亡细胞比例、细胞活性、凋亡相关蛋白的表达等.[结果]PEDV JS2013感染Vero细胞后6 h即有少量病毒进入细胞,24 h后出现典型合胞体病变,PEDV JS2013诱导Vero细胞凋亡呈剂量依赖性,并且显著抑制Vero细胞活性.Hoechst染色后可以观察到明显的凋亡小体.Western blot结果表明,感染PEDV JS201348 h后激活Caspase 8和Caspase 9,60 h左右激活Caspase 3.[结论]PEDV流行毒株JS2013可以诱导Vero细胞凋亡.
基金项目
国家自然科学基金(31772701)
江苏省农业科技自主创新资金(CX173027)
家畜疫病病原生物学国家重点实验室(中国农业科学院兰州兽医研究所)开放基金(SKLVEB2020KFKT007)
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