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猪lincRNA-CXCL6调控LPS诱导炎症反应的机制研究

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[目的]本研究旨在探究猪长链非编码RNA lincRNA-CXCL6调控脂多糖(LPS)诱导炎症反应的分子机制,为防御猪的细菌性疾病引起的炎症损伤提供新的思路.[方法]利用互补DNA(cDNA)末端快速扩增技术获得lincRNA-CXCL6的全长序列,利用荧光定量PCR(qPCR)检测lincRNA-CXCL6的表达模式.构建lincRNA-CXCL6稳转的小鼠单核巨噬细胞白血病细胞(RAW264.7细胞),利用转录组测序分析lincRNA-CXCL6对LPS刺激后的细胞信号通路影响;利用Western blot和qPCR验证lincRNA-CXCL6通过细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)通路来调控LPS诱导的炎症因子表达.[结果]lincRNA-CXCL6全长985 bp,包含2个外显子.lincRNA-CXCL6在LPS和二酰脂肽(Pam2CSK4)刺激下表达量升高,并且随着LPS刺激时间的增加其表达量也逐渐升高;lincRNA-CXCL6在猪成年组织中仅微弱表达于肺和小肠,且主要表达于细胞质中.lincRNA-CXCL6过表达抑制了LPS诱导的白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)mRNA的转录.转录组数据显示,与对照相比,LPS刺激后,lincRNA-CXCL6过表达组有104个基因上调和165个基因下调.基因本体分析(GO分析)显示:165个下调基因主要参与免疫相关的生物学过程.lincRNA-CXCL6通过ERK1/2通路负调控IL-1β和趋化因子17(CCL17)的转录表达.[结论]猪lincRNA-CXCL6通过ERK1/2信号途径抑制LPS诱导的炎症因子表达.
The mechanism of porcine lincRNA-CXCL6 regulating LPS-mediated inflammation response

邢菲、方晓敏、杨晓阳、付言峰、陈哲、王丽、涂枫、任守文、李碧侠、陈杰、赵为民

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南京农业大学动物科技学院,江苏 南京210095

江苏省农业科学院畜牧研究所/江苏省农业种质资源保护与利用平台,江苏 南京210014

猪 长链非编码RNA 脂多糖 炎症反应 ERK1/2通路

3187233831601928GY201914JATS [2020]224

2021

10.7685/jnau.202011007

南京农业大学学报
南京农业大学

南京农业大学学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.939
ISSN：1000-2030
年,卷(期)：2021.44(5)
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