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PPQ通过清除活性氧修复子宫内膜细胞增殖能力的作用研究

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目的:设计并合成聚乙二醇修饰负载槲皮素的聚多巴胺(PDA)类黑色素纳米粒子(PPQ),检测其物化表征及活性氧(ROS)清除能力,并进一步探究其改善子宫内膜异位症能力.方法:采用透射电子显微镜(TEM)、水合粒径(DLS)、Zeta电位分析PPQ的形貌、粒径大小;利用紫外光谱(UV-Vis)分析PPQ中槲皮素的载药浓度及包封率;利用总抗氧化能力的检测试剂(DPPH和ABTS)检测槲皮素、聚乙二醇修饰PDA(PEG-PDA)及PPQ的ROS清除能力;将人子宫异位子宫内膜上皮细胞系(hEM15A)分为对照组及刺激组,并将刺激组分别用槲皮素、PEG-PDA及PPQ进行孵育处理,进一步采用激光共聚焦、细胞毒性试验、细胞活性染色、细胞EdU增殖染色试验及子宫内膜异位症小鼠模型评估PPQ清除ROS改善子宫内膜异位症的作用.结果:TEM及DLS结果提示制备的PDA、PEG-PDA及PPQ为100 nm左右的圆球颗粒,其电位分别为-30、-32、-35 mV左右.紫外光谱提示槲皮素的载药率和包封率分别为≤23％和≤85％.总抗氧化能力检测试剂结果提示槲皮素、PEG-PDA及PPQ均可减少氧自由基的含量,且随着浓度升高其含量越少,同时PPQ展示出最好的ROS清除能力.激光共聚焦实验结果提示:相比于对照组,IL-1β可显著上调hEM15A细胞内ROS水平(P＜0.001),而槲皮素、PEG-PDA及PPQ都会降低IL-1β处理的hEM15A细胞内ROS水平(P＜0.001),且相比于槲皮素和PEG-PDA,PPQ在细胞内可更有效清除ROS(P＜0.001).细胞毒性试验、细胞活性染色及EdU增殖染色试验结果表明:相比于对照组,IL-1β可显著降低hEM15A细胞的存活率、增殖能力及增加细胞死亡率(P＜0.001),而槲皮素、PEG-PDA及PPQ可增加IL-1β处理的hEM15A细胞存活率及增殖能力,降低死亡率(P＜0.001),且相比于槲皮素和PEG-PDA,PPQ对处理的细胞效果最显著(P＜0.001).在体试验显示:PPQ在子宫内膜异位症区域有良好的富集作用,且相比于对照组,PPQ可缩小子宫内膜异位症区域的体积(P＜0.001),同时显著降低其ROS水平(P＜0.001).结论:PPQ具有良好的清除ROS功能,是治疗子宫内膜异位症的一种潜在新方法.

彭佳欣、冯文翔、李奕霖、龚熊美玉、曾聚涛、李伟

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汕头大学第二附属医院,广东汕头 515041

南方医科大学南方医院第二临床医学院,广东广州 510515

聚乙二醇修饰负载槲皮素的聚多巴胺类黑色素纳米粒子 活性氧 子宫内膜细胞 增殖能力 小鼠

湖南省临床医疗技术创新引导项目湖南省卫生健康委一般指导课题湖南省乳甲疾病防治临床医学研究中心项目

2020SK517062022040138432018SK4001

2024

10.3969/j.issn.1671-6264.2024.03.015

东南大学学报(医学版)
东南大学

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CSTPCD
影响因子：1.374
ISSN：1671-6264
年,卷(期)：2024.43(3)
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