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梭梭HabHLH74转录因子基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

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利用分子生物学技术从梭梭中克隆了HabHLH74转录因子基因,在大肠杆菌中表达HabHLH74蛋白,旨在为梭梭抗逆分子机理提供研究基础.研究结果表明:①利用RT-PCR技术成功扩增了HabHLH74的完整编码区cDNA序列,HabHLH74编码区cDNA序列长度为1 218 bp.根据HabHLH74编码区序列预测出其编码蛋白的理化性质.②成功构建了HabHLH74基因的原核表达载体pET28a(+)-HabHLH74,并在大肠杆菌中成功表达了梭梭HabHLH74蛋白,其分子量为43.6 kDa.③对诱导条件进行单因素试验后获得的最佳诱导表达条件:诱导剂IPTG浓度为0.5 mmol/L,诱导温度为37℃,诱导时间为6h.④对在优化条件下诱导后的菌体进行超声破碎后发现梭梭HabHLH74蛋白主要以包涵体形式存在;降低诱导温度(16℃、25℃诱导)未能得到可溶性表达的梭梭HabHLH74蛋白.
Gene Cloning of Transcription Factor HabHLH74 from Haloxylon ammodendron and Expression in Escherichia coli

王力伟、赵沛义、王朝、房永雨、刘红葵、郭慧琴、王蕴华、何江峰

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内蒙古自治区农牧业科学院,内蒙古 呼和浩特010031

内蒙古农业大学生命科学学院,内蒙古 呼和浩特010011

梭梭 HabHLH74转录因子 克隆 原核表达

内蒙古自治区农牧业创新基金内蒙古自然科学基金内蒙古自治区科技重大专项

2019CXJJM152018MS030062020ZD0005-02

2020

10.12160/j.issn.1672-5190.2020.05.003

畜牧与饲料科学
内蒙古自治区农牧业科学院

畜牧与饲料科学

CSTPCD
影响因子：0.332
ISSN：1672-5190
年,卷(期)：2020.41(5)
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