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猪圆环病毒2型灭活疫苗中病毒抗原含量实时荧光定量PCR检测方法的建立

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依据GenBank公布的猪圆环病毒2型Cap基因序列,在保守区域设计特异性引物和TaqMan探针,优化反应体系,建立评价猪圆环病毒2型灭活疫苗中病毒含量的实时荧光定量PCR检测方法,对方法的特异性、敏感性和重复性进行试验,并验证灭活剂用量和灭活时间对检测结果的影响.结果显示:该方法只对猪圆环病毒2型基因有特异性扩增,其他3种对照病毒基因的扩增结果均为阴性;检测灵敏度达到102.0 TCID50/mL,比普通PCR方法高100倍;方法的重复性好,对同一样品进行10次检测,变异系数为2.28％;不同灭活剂用量和灭活时间对结果的影响较小,不会因各厂家使用的灭活剂用量和灭活时间不同,影响疫苗对比实验的公平性.该研究成功建立了一种评价猪圆环病毒2型灭活疫苗中病毒含量的实时荧光定量PCR检测方法,用于猪圆环病毒2型灭活疫苗样品中病毒抗原含量的定量,其结果可以反映不同猪圆环病毒2型灭活疫苗样品中抗原含量差异,为研究猪圆环病毒2型灭活疫苗病毒抗原含量评估方法提供了新的思路.
Establishment of a Real-time Fluorescence Quantitative PCR Assay for Antigen Quantification of Inactivated Porcine Circovirus Type 2 Vaccines

李雪峰、康斌、赵炳武、武玉梅、戴伶俐、董鹏、张建春、张春阳、斯琴高娃

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金河佑本生物制品有限公司,内蒙古 呼和浩特 011517

内蒙古自治区农牧业科学院,内蒙古 呼和浩特010031

杭州佑本动物疫苗有限公司,浙江 杭州 310018

实时荧光定量PCR 猪圆环病毒2型 灭活疫苗 Cap基因

2021

10.12160/j.issn.1672-5190.2021.01.002

畜牧与饲料科学
内蒙古自治区农牧业科学院

畜牧与饲料科学

CSTPCD
影响因子：0.332
ISSN：1672-5190
年,卷(期)：2021.42(1)
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