[目的]研究牛活体采卵-体外受精(ovum pick-up and in vitro fertilization,OPU/IVF)体系,建立高效的牛体外胚胎生产系统.[方法]以从屠宰场采集的健康牛新鲜卵巢为试验材料,进行卵母细胞体外成熟、体外受精、体外胚胎培养相关条件的摸索,重点考查体外胚胎培养液中添加瘦素(leptin)对囊胚率的影响.选取 13～15 月龄健康荷斯坦奶牛及和牛各 10 头作为供体,进行活体采卵、卵母细胞体外成熟、体外胚胎生产,记录可用卵数及可用囊胚数,统计卵裂率、囊胚率;2 个品种牛的体外冷冻胚胎解冻后,以荷斯坦奶牛为受体进行胚胎移植,移植后 45d统计妊娠率.[结果]添加 30 U/mL的leptin可以显著(P＜0.05)提高屠宰场来源牛体外胚胎的囊胚率.随机选择供体牛活体采卵,平均每头荷斯坦奶牛获得可用卵 7.5 枚,平均每头和牛获得可用卵 8.1 枚;荷斯坦奶牛及和牛的卵裂率分别为 84.00%、82.71%,二者差异不显著(P＞0.05).体外培养条件下,平均每头荷斯坦奶牛获得可用囊胚 4.3 枚,平均每头和牛获得可用囊胚 3.7 枚;荷斯坦奶牛的囊胚率(57.33%)显著(P＜0.05)高于和牛(45.68%).体外胚胎解冻后移植,荷斯坦奶牛胚胎组的妊娠率为 54.17%,和牛胚胎组的妊娠率为 55.79%,二者差异不显著(P＞0.05).[结论]该研究建立的OPU/IVF体系可以有效提高优质母牛的利用效率,降低生产成本,为牛体外胚胎生产系统的优化提供了参考.
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