摘要
猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是引发仔猪(Sus scrofa)腹泻的常见病原,仔猪感染PEDV后小肠黏膜屏障被破坏,引发腹泻,其中粘附连接(adherens junction,AJ)是肠道黏膜屏障重要的组成部分.为了探讨PEDV对仔猪小肠黏膜屏障以及粘附连接蛋白基因表达的影响,本研究通过石蜡切片光镜观察PEDV对仔猪小肠黏膜的影响,并利用荧光定量PCR检测E-钙粘蛋白(E-cad-herin)、整合素(Integrin)和结合素1(Nectin-1)基因在PEDV感染和正常仔猪肠道以及细胞感染中的表达变化,进一步分析其与肠道屏障功能的关系.结果显示,感染PEDV的仔猪肠道绒毛受损、脱落,固有层暴露,肠腺萎缩;而正常仔猪肠道黏膜屏障结构完整、层次分明.PEDV感染组十二指肠中E-cadherin基因表达量显著低于正常组(P<0.05),空肠中Nectin-1基因表达量极显著低于正常组(P<0.01),其余无显著差异.细胞感染实验同样显示PEDV侵染猪小肠上皮细胞(intestinal porcine epithelial cell line J2,IPEC-J2)后E-cadherin和Nectin-1基因表达量显著降低.研究结果表明,PEDV感染仔猪肠道发生明显病变,小肠黏膜屏障受损,粘附连接被破坏,其中E-cadherin和Nectin-1基因表达显著下调,不利于维持肠道黏膜屏障完整性,而肠道黏膜屏障的受损可能进一步促进了仔猪腹泻的发生.本研究初步揭示了PEDV对仔猪小肠黏膜屏障以及粘附连接的影响,为今后从肠道屏障角度研究PEDV的致病机理提供理论参考.
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