农业生物技术学报2021，Vol.29Issue(3) ：424-434.DOI:10.3969/j.issn.1674-7968.2021.03.002

花鲈C型凝集素受体CD302基因的分子鉴定及其在哈维氏弧菌感染下的表达

Molecular Identification of C-type Lectin Receptor Gene CD302 from Japanese sea bass (Lateolabrax japonicus) and Its Expression upon Vibrio harveyi Infection

张艺榕 李长红 陈炯
农业生物技术学报2021，Vol.29Issue(3) ：424-434.DOI:10.3969/j.issn.1674-7968.2021.03.002
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花鲈C型凝集素受体CD302基因的分子鉴定及其在哈维氏弧菌感染下的表达

Molecular Identification of C-type Lectin Receptor Gene CD302 from Japanese sea bass (Lateolabrax japonicus) and Its Expression upon Vibrio harveyi Infection

张艺榕 1李长红 1陈炯1
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作者信息

  • 1. 宁波大学海洋学院生物化学与分子生物学实验室,宁波315832
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摘要

分化簇抗原302(cluster of differentiation 302,CD302),又称DEC-205相关的C型凝集素-1(DEC-205-associated C-type lectin-1,DCL-1),是一种Ⅰ型跨膜C型凝集素受体(C-type lectin receptor,CLR),参与细胞粘附、迁移、胞吞和吞噬等过程,在抵抗病原感染的过程中发挥着重要作用.本研究从花鲈(Lateolabrax japonicus)组织转录组中获得LjCD302 cDNA序列(GenBank No.MT468568).LjCD302 cDNA全长2280个核苷酸,开放阅读框包含729个核苷酸,编码由242个氨基酸(anomic acid,aa)组成、分子量为26.9 kD以及等电点为4.97的多肽.LjCD302分子内包含1个信号肽序列(aa 1～27)、1个C型凝集素样结构域(C-type lectin-like domain,CTLD)(aa 30～165)、1个跨膜结构域(aa 179～201)和1个胞质尾区(aa 202～242).氨基酸序列同源性分析显示,LjCD302与尖吻鲈(Lates calcarifer)CD302同源性最高,为82.0％.系统进化树分析表明,鱼类、两栖类、爬行类及哺乳动物CD302单独成簇,LjCD302位于鱼类这一大簇中,与尖吻鲈进化关系最近.实时荧光定量PCR分析表明,LjCD302 mRNA主要在健康花鲈肝中表达,其次是头肾;哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)感染后,LjCD302 mRNA在头肾、鳃、肠、脾和肝组织中的表达均显著上调(P<0.05).原核表达了LjCD302的CTLD结构域,并制备了抗血清.Western blot分析表明,LjCD302在哈维氏弧菌感染花鲈的头肾中表达量显著增加(P<0.05).综上,LjCD302 mRNA与蛋白的表达与哈维氏弧菌感染呈正相关,提示其可能在鱼类抗菌免疫应答中发挥重要作用.研究结果为进一步研究鱼类CLR的功能及其在抗菌免疫中的作用机制提供基础.

关键词

花鲈/分化簇抗原302(CD302)/哈维氏弧菌/基因表达/Western/blot

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基金项目

出版年

2021
农业生物技术学报
中国农业大学 中国农业生物技术学会

农业生物技术学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.801
ISSN：1674-7968
被引量1
参考文献量4
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