摘要
枯萎病和炭疽病是草莓(Fragaria ananassa)最为常见的主要病害,病原分别为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)和炭疽菌(Colletotrichum spp.),目前的检测手段主要采用传统的病原菌培养法和常规PCR法,而环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术可用于草莓枯萎病和炭疽病的病原菌快速检测.本研究针对尖孢镰刀菌rDNA间隔区(intergenic spacer,IGS)的保守区域设计了 1套LAMP扩增引物,并设计了炭疽菌内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)特异序列的LAMP引物,利用LAMP技术快速、准确地将草莓尖孢镰刀菌和炭疽菌进行分辨和检测.结果表明,建立的LAMP法能够特异性检测尖孢镰刀菌和炭疽菌,检测灵敏度为10×10-5ng/μL,是普通PCR检测灵敏度的1 000倍.本研究建立的草莓枯萎病和炭疽病快速LAMP检测方法具有灵敏度高、快速及简便的优点,是可以向基层单位推广的检测手段,对于草莓病原菌实时监测和前期预警具有重要作用.
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