摘要
肌内脂肪是衡量牛肉品质的重要指标,肌内前脂肪细胞的分化对于大理石纹牛肉的形成至关重要.本研究旨在探究丙酸对肉牛(Bos taurus)肌内前脂肪细胞分化的影响,从细胞和分子水平解析肉牛肌内脂肪组织分化的信号机制.采用Ⅰ型胶原酶消化法分离获得牛肌内前脂肪细胞,设计不同剂量丙酸(1,3和6 mmol/L)、胰岛素(10 μg/mL)和地塞米松(0.25 μmol/L)的不同组合分化培养基,诱导培养肉牛肌内前脂肪细胞6 d.细胞内脂肪含量测定和qRT-PCR技术分析表明,丙酸呈剂量依赖性地增加肌内前脂肪细胞胞质内脂肪含量(P＜0.05),1、3和6mmol/L的丙酸均显著升高了肌内前脂肪细胞中PPARγ、C/EBPαmRNA的表达水平(P＜0.05).在丙酸、胰岛素和地塞米松都加入培养基时,培养的细胞胞质内脂肪含量最高,细胞中PPARγ、C/EBPαmRNA的表达水平最高.然而,当分别去掉胰岛素和地塞米松后,培养的细胞胞质内脂肪含量分别下降77％、85％,细胞中PPARγ、C/EBPα mRNA的表达显著降低(P＜0.05).而且,当从分化培养基中去除丙酸时,培养的细胞胞质内脂肪含量也降低了 68％,细胞中PPARγ、C/EBPαmRNA的表达水平也显著降低(P＜0.05).以上结果表明,丙酸刺激肉牛肌内前脂肪细胞的分化可能是通过发挥类似激素(如胰岛素或地塞米松)的第一信使功能,作为信号分子通过信号转导机制达到刺激肌内前脂肪细胞的分化.本研究为阐明肉牛肌内脂肪的沉积机制,实现营养调控模式生产高档牛肉提供基础资料.
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