摘要
乳腺癌相关蛋白2(breast carcinoma amplified sequence 2,BCAS2)能够参与多种细胞的DNA损伤反应、蛋白质稳定性改变及pre-mRNA剪接等过程.有关BCAS2在小鼠(Mus musculus)生殖细胞形成、早期胚胎发育、卵巢颗粒细胞中的作用研究较多,然而该基因是否参与调控家畜卵泡中颗粒细胞的增殖或凋亡仍未见报道.本研究向体外培养的猪(Sus scrofa)颗粒细胞中添加促卵泡素(follicle stimulating hormone,FSH),观察是否影响BCAS2的表达;采用RNAi技术敲低BCAS2,检测细胞凋亡情况及相关基因的表达水平.结果显示,100 ng/mL FSH处理24 h后BCAS2 mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.05).BCAS2敲低后颗粒细胞凋亡率显著增加(P<0.05),抗凋亡因子B淋巴细胞瘤2蛋白基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)表达量显著降低(P<0.05),增殖细胞核抗原基因(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达量极显著降低(P<0.01),Bcl-2相关X蛋白基因(Bcl-2 associated X protein,Bax)表达水平显著增高(P<0.05).同时微管蛋白β基因(tubulinβ,TUBB)、TUBA1A和雌激素受体2基因(estrogen receptor 2,ESR2)表达量极显著降低(P<0.01),ESR1表达量显著降低(P<0.05),肿瘤蛋白53基因(tumor protein p53,p53)表达量显著升高.表明BCAS2基因敲低能够引起猪颗粒细胞凋亡,其调控机制可能涉及pre-mRNA剪接、雌激素受体(estrogen receptor,ER)转录调控或p53通路.本研究为进一步揭示家畜卵泡发育潜在的调控机制提供理论依据.
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