摘要
牛奶中的长链脂肪酸(long chain fatty acids,LCFA)尤其是长链多不饱和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFA)有助于降低人类(Homo sapiens)患心血管疾病、癌症、二型糖尿病的风险.但目前对乳腺组织中LCFA合成、代谢的分子机制知之甚少.脂肪酸转运蛋白6(solute carrier family 27 member 6,SLC27A6)的主要功能是促进细胞从外界摄取LCFA,进而参与细胞内的各类脂质代谢.但是目前SLC27A6与乳腺脂质代谢基因之间的调控关系尚不明确.本研究利用siRNA干扰技术干预奶牛(Bos taurus)乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMECs)中SLC27A6的表达,采用荧光定量PCR分析乳腺细胞中SLC27A6和脂质代谢相关基因的表达,利用Western blot技术分析了蛋白的表达变化,并对细胞内甘油三酯含量和脂肪酸组成的变化进行分析.结果显示,与对照组相比,转染siRNA SLC27A6-Bos-915后,SLC27A6基因和蛋白质的表达量明显下降,细胞内参与脂肪酸激活和转运的关键基因长链脂肪酸乙酰辅酶A合成酶4基因(long-chain acyl-CoA synthetase 4,ACSL4)和脂肪酸转运蛋白基因CD36、脂肪氧化相关基因肉毒碱棕榈酰转移酶基因(carnitine palmitoyl transferase 1A,CPT1A)的表达量下降,过氧化物酶体增生激活受体γ(peroxisome proliferative activated receptor gamma,PPARG)、脂肪酸结合蛋白(fatty acid binding protein 3,FABP3)基因及脂肪酸去饱和酶(fatty acid desaturase 2,FADS2)基因的表达量上升.与此同时,细胞内的甘油三酯含量上升,棕榈酸(C16:0)和硬脂酸(C18:0)的含量降低,油酸(C18:1cis9)和花生四烯酸(C20:4cis5,8,11,14)的含量上升.本研究可为解析SLC27A6在调节奶牛乳腺脂质代谢中的机制提供参考,为实现乳成分的定向遗传调控,生产优质原料奶提供理论依据.
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