摘要
为建立一种能快速、高效、简便检测非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)抗体的方法,本研究采用原核表达系统表达ASFV衣壳蛋白(p72)作为捕捉抗原,以纯化的抗ASFV p72蛋白多克隆抗体和兔抗猪IgG分别包被于硝酸纤维素膜上,分别作为质控线(C线)和检测线(T线),优化反应条件,制备胶体金免疫层析试纸条(colloidal gold immunochromatographic test strip,ICTS),用于临床样品检测.结果表明,本研究成功构建pCold-TF-p72重组蛋白,经Western blot和琼脂扩散实验表明,制备的抗p72多克隆抗体具有良好的反应原性与免疫原性;制备的胶体金试纸条与针对猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)、猪圆环病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)阳性血清无交叉反应,具有良好的特异性;临床样品阳性检出率为55.17％(48/87),商品ELISA试剂盒阳性检出率为59.77％(52/87),两者阳性符合率为92.31％(48/52).本研究制备的胶体金试纸条为临床ASFV抗体检测及疫病预防具有一定的参考意义.
基金项目
四川省科技计划(2021YJ0270)
成都市科技计划技术创新研发项目(2020)(2019-YF05-00119-SN)
成都农业科技职业学院院级科研基金(2020)(20ZR101)
维普
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