摘要
细胞凋亡是维持免疫器官稳态及发挥功能的重要方式,有利于山羊(Capra hircus)在运输应激下维持体内平衡.本研究旨在探讨运输应激对山羊免疫器官细胞凋亡及B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(B-cell lymphoma-2 associated X protein,Bax)表达的影响.将12头健康赣西公山羊随机分为3组:对照组(不运输)、运输2h组、运输6h组.运输完成后采集山羊的免疫器官(脾脏,肠系膜淋巴结),采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(terminal dexynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)观察免疫器官细胞凋亡的情况,用免疫组织化学、Western blot和qPCR方法在蛋白和基因水平上进行定位和检测.TUNEL分析结果显示,运输2和6 h组的脾脏和淋巴结细胞凋亡率极显著高于对照组(P<0.01);免疫组化结果显示,运输前后Bax和Bcl-2在脾脏的脾小结及其边缘区和淋巴结的淋巴小结及其周围弥散淋巴组织都有阳性表达,但3组间表达强度不同.Western blot结果显示,脾脏和淋巴结的Bax、Bcl-2蛋白表达量及其比率Bax/Bcl-2在3组间并无统计学差异(P>0.05).qPCR结果显示,与对照组相比,运输2和6 h组脾脏的Bax和Bcl-2基因表达量与运输6 h组Bax/Bcl-2的比率均极显著升高(P<0.01),在淋巴结中,运输2 h组Bax和Bcl-2基因表达量极显著降低(P<0.01),而运输6 h组Bcl-2基因表达量极显著升高(P<0.01),运输2和6 h组Bax/Bcl-2的比率极显著降低(P<0.01).本研究结果表明,运输应激会导致免疫器官的细胞凋亡增加,且Bax和Bcl-2基因发生显著变化.本研究为防治运输应激对山羊造成的影响提供了一定的理论依据.
基金项目
国家重点研发项目(2017YFD0502200)
江西现代农业科研协同创新专项(JXXTCX201702)
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