摘要
单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是一种对外界环境具有广泛适应性的人兽共患革兰氏阳性菌.为了解sRNA rli82对LM环境应激及生物被膜(biofilm,BF)的调控作用.本研究以LM EGD-e基因组为模板,扩增sRNA rli82,并利用生物信息学分析rli82的分子特征和可能调控的潜在靶基因;通过同源重组技术构建rli82基因缺失株LM-Δrli82及回补株LM-Δrli82/rli82,比较其在不同胁迫环境下的生长情况及BF形成能力的差异,并通过qPCR检测与环境应激和BF形成相关基因的转录水平.结果显示,rli82基因全长70 bp,二级结构拥有2个大的茎环结构,其调控的潜在靶基因为肉碱转运结合蛋白(carnitine transport binding protein,opuCC).LM-Δrli82与LM EGD-e和LM-Δrli82/rli82相比,在不同渗透压(4％和8％NaCl)处理下,LM-Δrli82环境适应能力显著增强,而在3.8％乙醇、pH4、pH9以及30℃的应激处理下环境适应能力显著降低.3株菌的BF形成能力无明显差异.qPCR显示与环境应激有关基因相对表达量显著降低,表明rli82对LM的环境应激适应能力发挥了重要的调控作用,本研究为进一步揭示sRNA rli82调控LM环境应激能力的分子机制提供了参考.
基金项目
国家重点研发计划子课题(2016YFD0500900)
国家自然科学基金(31360596)
国家自然科学基金(30960274)
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