农业生物技术学报2022，Vol.30Issue(8) ：1454-1467.DOI:10.3969/j.issn.1674-7968.2022.08.002

木薯MeAHL19的互作蛋白筛选及鉴定

Screening and Identification of Interaction Proteins of MeAHL19 in Cassava (Manihot esculenta)

张建禹 王晓彤 耿沙 毋志浩 任思杨 李瑞梅 姚远 郭建春 刘姣 胡新文
农业生物技术学报2022，Vol.30Issue(8) ：1454-1467.DOI:10.3969/j.issn.1674-7968.2022.08.002
✕
  • 国家科技期刊平台
  • NETL
  • NSTL
  • 维普
  • 万方数据

木薯MeAHL19的互作蛋白筛选及鉴定

Screening and Identification of Interaction Proteins of MeAHL19 in Cassava (Manihot esculenta)

张建禹 1王晓彤 1耿沙 2毋志浩 2任思杨 1李瑞梅 3姚远 3郭建春 3刘姣 3胡新文4
扫码查看

作者信息

  • 1. 海南大学生命科学学院,海口570228;中国热带农业科学院热带生物技术研究所/海南热带农业资源研究院,海口571101
  • 2. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/海南热带农业资源研究院,海口571101;海南大学热带作物学院,海口570228
  • 3. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所/海南热带农业资源研究院,海口571101
  • 4. 海南大学生命科学学院,海口570228
  • 折叠

摘要

AT-hook核定位蛋白(AT-hook motif nuclear localized protein,AHL)是一类具有AT-hook基序的核定位蛋白,在植物生长发育过程中起着重要的调控作用.为探究木薯(Manihot esculenta)AHL家族成员MeAHL19的生物学功能以及其在蛋白互作网络中的作用.本研究采用T4连接法构建诱饵载体pGBKT7-MeAHL19,利用酵母(Saccharomyces cerevisiae)双杂交技术(yeast two-hybrid,Y2H)在木薯cDNA文库中筛选MeAHL19的互作蛋白,采用实时荧光定量PCR技术分析MeAHL19及其互作蛋白的基因表达模式.结果显示:酵母双杂交筛库获得20个阳性克隆,经PCR扩增并测序比对后鉴定出8个候选互作蛋白,Y2H回转验证发现,MeAHL19蛋白与核酮糖二磷酸羧化酶小链(ribulose bisphosphate carboxylase small chain,RBCS)蛋白可在体外互作;双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation,BiFC)实验进一步验证了MeAHL19与RBCS在本氏烟草(Nocotinan benthamiana)叶肉细胞中发生互作.基因表达模式分析表明,MeAHL19主要在根中表达,而RBCS在根、茎和叶中的表达水平基本一致;MeAHL19与RBCS在木薯中共同响应非生物胁迫和外源激素应答.本研究为进一步探究MeAHL19在木薯逆境响应过程中的生物学功能提供了科学参考.

关键词

木薯/木薯AT-hook核定位蛋白19(MeAHL19)/酵母双杂交/互作蛋白/双分子荧光互补

引用本文复制引用

基金项目

出版年

2022
农业生物技术学报
中国农业大学 中国农业生物技术学会

农业生物技术学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.801
ISSN：1674-7968
被引量1
参考文献量7
段落导航相关论文