摘要
组蛋白去乙酰化酶6(histone deacetylase 6,HDAC6)是一种重要的表观遗传修饰蛋白,双向调节蛋白(amphiregulin,AREG)是一种重要的上皮样生长因子(epidermal growth factor-like,EGF-like),二者对哺乳动物的生殖均具有重要调控作用.为了探讨HDAC6及AREG在滩羊(Ovis aries)卵巢不同发育阶段卵泡中的表达规律,分析二者在卵泡发育过程中的相关性,本研究通过免疫组化、免疫荧光及Western blot的方法,检测HDAC6及AREG在滩羊卵巢不同发育阶段卵泡中的定位及表达模式,并利用Pearson法分析HDAC6及AREG在卵泡发育过程中的相关性.结果显示,HDAC6在滩羊卵巢不同发育阶段卵泡的颗粒细胞和卵母细胞中均有表达,且主要在颗粒细胞和卵母细胞细胞质中表达.随着卵泡发育,HDAC6在不同发育阶段卵泡中的表达水平呈先升后降的趋势,且其表达水平在直径大于6 mm的卵泡中极显著的低于直径小于2 mm的卵泡(P<0.001);AREG主要表达于滩羊卵巢不同大小卵泡的颗粒细胞中,且主要在颗粒细胞质中表达.随着卵泡发育,AREG在不同发育阶段卵泡中的表达水平呈逐渐上升趋势,且其表达水平在直径大于6 mm的卵泡中极显著的高于直径小于2 mm的卵泡(P<0.01).相关性分析进一步发现,HDAC6与AREG在滩羊不同直径卵泡中的表达均呈负相关关系,其中直径小于2 mm的卵泡中HDAC6与AREG的表达呈中度负相关,直径2～6 mm的卵泡中HDAC6与AREG的表达呈极强负相关,直径大于6 mm的卵泡中HDAC6与AREG的表达呈极弱负相关.以上结果表明,HDAC6和AREG在滩羊卵巢不同发育阶段的卵泡中均有表达,且二者的表达模式总体上呈负相关的关系,提示二者可能通过负相关的调控方式参与了滩羊卵巢中卵泡的发育过程.本研究为深入探讨滩羊卵巢不同发育阶段卵泡中颗粒细胞和卵母细胞内HDAC6及AREG的表达关系及二者对滩羊卵泡发育和卵母细胞成熟的影响与可能机制提供了重要参考.
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