农业生物技术学报2022，Vol.30Issue(10) ：1962-1975.DOI:10.3969/j.issn.1674-7968.2022.10.011

中间球海胆SiPFK基因的克隆及酸化-高温胁迫对其表达的影响

Cloning of SiPFK Gene from Strongylocentrotus intermedius and the Effect of Acidification-High Temperature Stress on Its Expression

焦仁和 崔东遥 武博琼 宋坚 常亚青 湛垚垚
农业生物技术学报2022，Vol.30Issue(10) ：1962-1975.DOI:10.3969/j.issn.1674-7968.2022.10.011
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中间球海胆SiPFK基因的克隆及酸化-高温胁迫对其表达的影响

Cloning of SiPFK Gene from Strongylocentrotus intermedius and the Effect of Acidification-High Temperature Stress on Its Expression

焦仁和 1崔东遥 1武博琼 1宋坚 1常亚青 1湛垚垚1
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作者信息

  • 1. 大连海洋大学农业农村部北方海水增养殖重点实验室,大连116023
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摘要

糖酵解途径中的关键酶磷酸果糖激酶(phosphofructokinase,PFK)在棘皮动物调节和适应海洋环境变化中发挥重要作用.为明确中间球海胆(Strongylocentrotus intermedius)PFK基因的序列信息和表达规律,初步了解"酸化-高温"胁迫对其表达和生物活力的影响,本研究通过cDNA末端快速扩增(rapid-amplification of cDNA ends,RACE)技术获得中间球海胆磷酸果糖激酶基因SiPFK的全长cDNA序列(GenBank No.OM780114),并利用生物信息学软件分析其序列特征,在此基础上,比较分析了"酸化-高温"胁迫条件下,中间球海胆的肠和性腺组织中SiPFK基因的相对表达及其酶活力变化情况.结果表明,SiPFK基因的cDNA全长为2787 bp,编码840个氨基酸,SiPFK蛋白理论等电点为7.48,蛋白质分子质量为92.01 kD;生物信息学分析显示,SiPFK蛋白氨基酸序列与紫球海胆(S.purpuratus)PFK氨基酸序列最为相似,相似度为96.20％;qPCR和酶活力测定结果显示,SiPFK基因的相对表达和总酶活力的组织特异性较为明显,"酸化-高温"胁迫60 d后,与对照组相比,处理组中间球海胆的肠和性腺组织中SiPFK基因的相对表达量和SiPFK酶活力均发生了改变,推测"酸化-高温"胁迫可能通过调控糖代谢关键酶活力对海胆的物质代谢过程产生影响.本研究为探究棘皮动物响应未来海洋环境变化提供重要参考依据.

关键词

中间球海胆/磷酸果糖激酶(PFK)/基因克隆/"酸化-高温"胁迫/表达模式/酶活力

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基金项目

出版年

2022
农业生物技术学报
中国农业大学 中国农业生物技术学会

农业生物技术学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.801
ISSN：1674-7968
被引量1
参考文献量8
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