摘要
自噬作为一种主要的降解/再循环途径,在维持细胞内稳态和生殖发育中发挥了重要作用.为探讨自噬在公猪(Sus scrofa)附睾发育过程中发挥的潜在作用,本研究以从江香猪附睾为对象,利用Western blot、免疫组织化学染色和qRT-PCR方法,分析了附睾在出生后15 d(初情期前)、30 d(初情期)、60 d(初情期后)和180 d(性成熟期)4个时期自噬相关分子的表达和分布.Western blot结果显示,Beclin1在60 d表达量最高、180 d表达量最低;哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)在30 d表达量最高、180 d最低;微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,MAP1LC3/LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ在180 d最高,在30和60 d最低.免疫组织化学染色结果显示,Beclin1在15、30和180 d集中分布于附睾上皮主细胞和微绒毛,在60 d主要分布于附睾上皮周围的肌样细胞;LC3在15、30和60 d附睾中集中分布于主细胞和微绒毛,但180 d在上皮窄细胞有特异性表达.qRT-PCR结果显示,自噬相关基因Beclin1表达量在15 d最高、180 d最低,15和30 d差异不显著;MAP1LC3B基因表达量在180 d最高、60 d最低,各日龄段差异显著(P<0.05).自噬相关蛋白12(autophagy related protein 12,Atg12)和Unc-51样激酶1(Unc-51-like kinase 1,ULK1)基因表达量变化趋势一致,在180 d最高、60 d最低,各日龄段差异显著(P<0.05);mTOR基因表达量在30 d最高、15 d最低,各日龄段差异显著(P<0.05).上述结果提示,从江香猪附睾发育过程中可能存在mTOR介导的自噬调节通路.本研究为探讨自噬参与附睾发育的调节机制提供基础资料.
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