摘要
耐除草剂大豆(Glycine max)'DBN9004'是我国自主研发的对除草剂草甘膦和草铵膦同时具有耐受性的转基因大豆新品种,已获得安全证书,在中国具有重要的产业化应用前景.为满足转基因作物安全监管技术要求,亟需对其进行定量检测方法的研发.本研究以耐除草剂大豆'DBN9004'的3'端旁侧序列为靶标,设计引物和探针,经特异性、正确度、精密度、检出限、定量限等指标测试,建立了该转化体特异性qPCR和微滴数字PCR检测方法.结果显示,本方法特异性强、重复性好,定量限达0.1%(约40个拷贝),检出限达0.05%(约20个拷贝),测试样品定值准确度高,相对标准偏差(RSD)为6.00%~10.95%,且qPCR与微滴数字PCR方法定量结果一致.该方法为耐除草剂大豆新品种'DBN9004'的精准定量检测提供了一种新的技术手段,为农业转基因监管提供技术支撑.