农业生物技术学报2022，Vol.30Issue(12) ：2464-2472.

基于猪流行性腹泻病毒基因Ⅱ型毒株S蛋白中和表位的间接ELISA和病毒中和试验的相关性分析

Correlation of Indirect ELISA Based on the Neutralizing Epitopes on the S Protein of Porcine epidemic diarrhea virus Genotype Ⅱ Strain with Virus Neutralization Assay

周一媚 董婉玉 王馨雨 郑谋凤 王志鹏 祝徐航 周莹珊 杨永春 宋厚辉 王晓杜
农业生物技术学报2022，Vol.30Issue(12) ：2464-2472.
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基于猪流行性腹泻病毒基因Ⅱ型毒株S蛋白中和表位的间接ELISA和病毒中和试验的相关性分析

Correlation of Indirect ELISA Based on the Neutralizing Epitopes on the S Protein of Porcine epidemic diarrhea virus Genotype Ⅱ Strain with Virus Neutralization Assay

周一媚 1董婉玉 2王馨雨 2郑谋凤 2王志鹏 2祝徐航 2周莹珊 2杨永春 2宋厚辉 2王晓杜2
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作者信息

  • 1. 浙江农林大学动物科技学院·动物医学院/浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室,杭州311300;浙江省瑞安市农业农村局,瑞安325200
  • 2. 浙江农林大学动物科技学院·动物医学院/浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室,杭州311300
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摘要

猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED)是一种由猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的高度传染性、高致死率疾病,导致3～10日龄仔猪(Sus scrofa)严重腹泻,该病的防控主要依赖于母猪疫苗免疫后乳汁中和抗体的保护作用,而快速地、高通量检测中和抗体方法有利于该病的防控.本研究通过方阵滴定、ELISA反应条件筛选、敏感性试验、特异性试验、符合性试验和中和试验等,确定基于PEDV基因Ⅱ型S蛋白中和表位的间接ELISA反应条件:抗原最佳包被浓度为0.2μg/孔,血清的最佳稀释度为1:100,血清最佳作用时间30 min,二抗最佳稀释度为1:6000,二抗最佳作用时间为60 min,底物最佳作用时间为10 min.该ELISA方法与临床常见病原(猪瘟病毒,伪狂犬病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒)的特异性抗体无交叉反应,组间和组内试验具有较好重复性.该ELISA方法与中和试验的结果关联分析表明,其直接正相关公式为:Y=0.3708X+1.3772(X为S/P值,Y为lg(1/中和效价-32),R2=0.963),相比中和试验的结果,本研究建立的ELISA方法敏感性为94.74％,特异性为91.67％,Kappa值为0.93.本研究建立的间接ELISA方法为临床PEDV中和抗体高通量检测和疫苗免疫效果评估提供了候选工具.

关键词

猪流行性腹泻病毒(PEDV)/间接ELISA/中和抗体/相关性

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基金项目

出版年

2022
农业生物技术学报
中国农业大学 中国农业生物技术学会

农业生物技术学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.801
ISSN：1674-7968
参考文献量1
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