农业生物技术学报2023，Vol.31Issue(1) ：213-222.DOI:10.3969/j.issn.1674-7968.2023.01.021

重组多杀性巴氏杆菌毒素的猪细胞毒性及其小鼠病理模型的建立

Porcine Cytotoxicity of Recombinant Pasteurella multocida Toxin and Establishment of Mouse (Mus musculus) Pathological Model

李金峰 袁建林 赵勤 杜森焱 伍锐 文翼平 黄小波 颜其贵 曹三杰
农业生物技术学报2023，Vol.31Issue(1) ：213-222.DOI:10.3969/j.issn.1674-7968.2023.01.021
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重组多杀性巴氏杆菌毒素的猪细胞毒性及其小鼠病理模型的建立

Porcine Cytotoxicity of Recombinant Pasteurella multocida Toxin and Establishment of Mouse (Mus musculus) Pathological Model

李金峰 1袁建林 1赵勤 1杜森焱 1伍锐 1文翼平 1黄小波 1颜其贵 1曹三杰1
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作者信息

  • 1. 四川农业大学动物医学院/猪病研究中心,成都611130;四川农业大学国家级动物类实验教学示范中心,成都611130;农业部兽用药物与兽医诊断技术四川科学观测站,成都611130
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摘要

多杀性巴氏杆菌毒素(Pasteurella multocida toxin,PMT)作为多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida)最重要的毒力因子之一,危害生猪健康,造成巨大经济损失.为鉴定重组多杀性巴氏杆菌毒素(Recombinant Pasteurella multocida toxin,rPMT)对4种猪细胞的毒性并构建其小鼠(Mus musculus)毒性病理模型.本研究构建pColdⅠ-toxA载体并可溶性表达rPMT;通过形态学观察、细胞增殖毒性(cell counting kit-8,CCK-8)检测及钙黄绿素/碘化丙啶(calcein/propidium iodide)染色探究rPMT对PK15等4种猪细胞的毒性.运用寇氏(Karber)法测定rPMT对C57BL/6J小鼠的半数致死剂量(the median lethal dose,LD50),并对rPMT攻毒后小鼠的心、肝、脾、肺、肾、小肠进行组织病理学分析.结果显示,rPMT蛋白(146 kD)表达于上清;rPMT处理4种猪细胞后,PK15细胞形态变化最明显,细胞死亡较多,细胞活性显著降低(P<0.05),而IPEC细胞活性显著升高(P<0.05);rPMT对C57BL/6J小鼠的LD50为0.490 ng/g(rPMT/体重);攻毒后小鼠肠绒毛脱落,肾脏、肝脏充血严重,脾脏红髓区脾窦出血、淋巴细胞数量减少并伴有大量色素沉积.本研究鉴定发现rPMT对4种猪细胞中的PK15毒性作用最大并成功构建了rPMT对C57BL/6J小鼠的毒性病理模型,为深入研究PMT的致病机制提供了理论基础.

关键词

重组多杀性巴氏杆菌毒素(PMT)/猪细胞/细胞毒性/小鼠病理模型

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基金项目

四川省川猪科技重大专项(十四五)(2021ZDZX0010)

中央引导地方科技发展专项(2021ZYD0086)

出版年

2023
农业生物技术学报
中国农业大学 中国农业生物技术学会

农业生物技术学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.801
ISSN：1674-7968
被引量1
参考文献量4
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