农业生物技术学报2023，Vol.31Issue(2) ：273-281.DOI:10.3969/j.issn.1674-7968.2023.02.006

大葱4-香豆酸辅酶A连接酶基因Af4CL的克隆及表达分析

Cloning and Expression Analysis of 4-coumaric Acid Coenzyme A Ligase Gene Af4CL in Allium fistulosum

李逸 徐欢欢 张宇辰 王永勤 刘乐承
农业生物技术学报2023，Vol.31Issue(2) ：273-281.DOI:10.3969/j.issn.1674-7968.2023.02.006
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大葱4-香豆酸辅酶A连接酶基因Af4CL的克隆及表达分析

Cloning and Expression Analysis of 4-coumaric Acid Coenzyme A Ligase Gene Af4CL in Allium fistulosum

李逸 1徐欢欢 1张宇辰 1王永勤 2刘乐承3
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作者信息

  • 1. 长江大学园艺园林学院,荆州434025;北京市农林科学院蔬菜研究中心/农业农村部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,北京100097
  • 2. 北京市农林科学院蔬菜研究中心/农业农村部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,北京100097
  • 3. 长江大学园艺园林学院,荆州434025
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摘要

4-香豆辅酶A连接酶(4-coumaric acid coenzyme A ligase,4CL)是类黄酮合成途径的一个关键酶,催化羟基香豆酸形成香豆酰辅酶A,香豆酰辅酶A是植物类黄酮生物合成的起始底物.本研究以大葱(Allium fistulosum)为材料,克隆了编码大葱4-香豆酸辅酶A连接酶的基因Af4CL(GenBank NO.OP921007),并进行了生物信息学分析,同时对Af4CL基因进行亚细胞定位和原核表达系统分析;结果显示,Af4CL编码区全长1644 bp,编码547个氨基酸;生物信息学分析表明,Af4CL具有2个保守结构域BoxⅠ和BoxⅡ;进化分析结果表明,大葱Af4CL与大蒜(Allium sativum)As4CL的亲缘关系最近.构建Pro35S:Af4CL-GFP载体,并利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的烟草(Nicotiana tabacum)叶片瞬时表达系统对Af4CL的定位进行了分析表明,Af4CL定位于细胞膜;利用原核表达系统成功诱导出目的蛋白.本研究为大葱类黄酮代谢的深入研究及类黄酮体外合成提供了参考.

关键词

大葱/4-香豆酸辅酶A连接酶(4CL)/生物信息学/亚细胞定位/表达分析

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基金项目

国家自然科学基金(31972409)

北京市农林科学院科技创新能力项目(KJCX20200113)

出版年

2023
农业生物技术学报
中国农业大学 中国农业生物技术学会

农业生物技术学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.801
ISSN：1674-7968
被引量1
参考文献量3
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