摘要
颗粒细胞在动物卵泡发育中具有重要作用,miRNA通过控制卵泡颗粒细胞的增殖和凋亡影响卵泡发育.本研究旨在揭示novel-miR-23900在绵羊(Ovis aries)卵泡颗粒细胞中的作用.首先将分离培养的绵羊卵泡颗粒细胞进行卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)处理,qPCR结果显示,FSH处理使增殖和凋亡相关基因CDK2、CDK4、CCND2和Bcl2表达量极显著升高(P<0.01),Bax和Casp3基因表达量以及novel-miR-23900水平极显著降低(P<0.01).进一步将novel-miR-23900模拟物及其阴性对照转染颗粒细胞,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测细胞增殖,采用线粒体膜电位检测试剂盒(JC-1)检测细胞凋亡,利用qPCR检测增殖与凋亡相关基因的表达变化.结果显示,转染novel-miR-23900模拟物72和96 h颗粒细胞的增殖能力显著降低(P<0.05),转染48 h增殖能力极显著降低(P<0.01),增殖相关基因CDK1、CDK4、CCNB1和CCNB2的表达量极显著降低(P<0.01),CDK2、CCND1和CCND2的基因表达量显著降低(P<0.05);转染novel-miR-23900模拟物48 h促进颗粒细胞凋亡,凋亡相关基因Bcl2表达量极显著降低(P<0.01),Casp3基因表达量极显著升高(P<0.01),Bax基因表达量显著升高(P<0.05).综上所述,novel-miR-23900抑制了绵羊卵泡颗粒细胞的增殖并促进其凋亡.本研究为探讨novel-miR-23900对绵羊颗粒细胞的影响及其在卵巢中发挥的作用提供基础资料.
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