摘要
选择性剪接是真核生物精密调控组织细胞类型和发育的重要方式.过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)是脂肪细胞分化的关键调控因子,其前体mRNA可能通过选择性剪接产生外显子5跳跃的亚型PPARγ∆5,影响脂肪细胞分化.本研究从3日龄仔猪(Sus scrofa)皮下脂肪组织中分离培养前体脂肪细胞,诱导分化,以qPCR检测基因mRNA表达.结果显示,PPARγ∆5在猪脂肪细胞分化早期表达极显著提高,中期达到高峰,后期极显著降低(P<0.01),其变化趋势与PPARγ及富含丝氨酸/精氨酸剪接因子(serine/arginine-rich splicing factor 1,SRSF1)一致.PPARγ激动剂罗格列酮处理可极显著提高细胞PPARγ∆5和SRSF1表达(P<0.01),而拮抗剂GW9662可极显著降低其表达(P<0.01).构建PPARγ∆5-siRNA重组慢病毒,转染猪前体脂肪细胞,PPARγ∆5表达极显著降低约75％(P<0.01).与转染阴性对照慢病毒和未转染细胞相比,PPARγ∆5表达沉默显著促进前体脂肪细胞分化及PPARγ和脂肪酸结合蛋白4(fatty acid-binding protein 4,FABP4)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(stearoyl-CoA desaturase,SCD)基因的表达(P<0.05),显著下调脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)基因mRNA表达(P<0.05).本研究提示,猪脂肪细胞依赖SRSF1及PPARγ的表达和活性,通过选择性剪接产生PPARγΔ5;PPARγΔ5是脂肪细胞分化的抑制子,可能通过负调控PPARγ表达减弱猪前体脂肪细胞分化.本研究结果为揭示猪脂肪形成的机制提供了新的依据.
基金项目
国家自然科学基金(31860633)
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