摘要
氧化应激介导的鹅(Anser cygnoides)卵泡颗粒细胞(granulosa cells,GCs)凋亡影响鹅产蛋性能.本研究旨在探讨抗氧化剂维生素E(vitamin E,VE)对鹅卵泡GCs凋亡的缓解作用.通过添加H2O2(100 μmol/L)建立鹅卵泡GCs氧化应激模型,并在体外检测氧化应激对鹅卵泡GCs凋亡的影响.在该模型中分别添加4种不同浓度的原花青素、白藜芦醇、没食子酸和VE,筛选出最佳缓解剂及最适浓度.进一步采用ELISA、qPCR和免疫荧光检测等技术探讨最佳缓解剂VE对氧化应激介导的鹅卵泡GCs凋亡的作用.结果表明,100 μmol/L H2O2处理12h极显著促进鹅卵泡GCs凋亡(P＜0.01);4种不同抗氧化剂中,40 μmol/L VE对氧化应激模型的缓解作用最佳(P＜0.01),添加后可减少细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的释放量(P＜0.05),降低氧化应激相关基因超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase 1,SOD-1)、SOD-2、过氧化氢酶(catalase,CAT)表达量、环氧化酶 2(cyclooxygenase,COX-2)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量(P＜0.05);细胞增殖活力显著上升(P＜0.05)且呈剂量依赖性,抗凋亡基因B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)的表达量显著上升(P＜0.05),促凋亡基因半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,Caspase3)、Caspase9和肿瘤抑制基因肿瘤蛋白p53(tumor protein p53,p53)的表达量显著下降(P＜0.05),细胞凋亡数显著降低(P＜0.05).本研究表明,在氧化应激诱导条件下,鹅卵泡GCs存在明显的凋亡,添加VE可抑制氧化应激缓解鹅卵泡GCs凋亡,本研究可为提高鹅的产蛋性能提供参考.
基金项目
江苏现代农业产业技术体系建设专项(JATS[2020]435)
江苏省高等学校大学生创新创业训练计划(202111117115Y)
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