农业生物技术学报2023,Vol.31Issue(8) :1767-1776.DOI:10.3969/j.issn.1674-7968.2023.08.019

4型副猪嗜血杆菌crp基因缺失株的构建及生物学特性分析

Construction and Biological Characteristics Analysis of crp Gene Deletion Strain of Haemophilus parasuis Type 4

徐引弟 王治方 焦文强 朱文豪 李海利 王克领
农业生物技术学报2023,Vol.31Issue(8) :1767-1776.DOI:10.3969/j.issn.1674-7968.2023.08.019

4型副猪嗜血杆菌crp基因缺失株的构建及生物学特性分析

Construction and Biological Characteristics Analysis of crp Gene Deletion Strain of Haemophilus parasuis Type 4

徐引弟 1王治方 1焦文强 1朱文豪 1李海利 1王克领1
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作者信息

  • 1. 河南省农业科学院畜牧兽医研究所,郑州450002
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摘要

副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis,HPS)是引起猪(Sus scrofa)革拉泽氏病(Glasser's disease)的病原,是临床上危害猪群健康的最为严重的细菌性病原之一.副猪嗜血杆菌血清型众多,其中4型是分离比例最高的血清型,也是危害较为严重的血清型.crp是编码环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)受体蛋白(cAMP receptor protein,CRP)的基因,CRP是最重要的系统调控因子之一,在细菌感染过程中适应环境变化具有重要作用.为了研究crp基因对4型副猪嗜血杆菌生长、抗性和毒力等生物学特性的影响,本研究采用自然转化法构建了4型副猪嗜血杆菌临床分离株HPS4的crp基因缺失株Δcrp,对HPS4及Δcrp的形态、生长特性、生物膜形成、压力耐受、血清杀菌活性、铁利用率和小鼠(Mus musculus)毒力等进行了研究.结果表明,本研究成功构建了4型副猪嗜血杆菌临床分离株HPS4的crp缺失株Δcrp,HPS4的crp基因缺失后,生长显著减慢,生物膜形成能力明显减弱,对渗透压、氧化应激和热应激的耐受能力降低,在血清中的存活能力下降,对铁的利用能力降低,对小鼠的毒力降低.研究结果表明,crp基因对HPS4的生长、抗性和毒力有明显的影响.本研究为进一步探究crp基因的功能,筛选HPS4弱毒株提供基础资料.

关键词

4型副猪嗜血杆菌(HPS4)/cAMP受体蛋白(crp)基因/缺失株/构建/抗性/毒力

Key words

Haemophilus parasuis serotype 4(HPS4)/cAMP receptor protein(crp)gene/Deletion strain/Constructed/Resistance/Virulence

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基金项目

国家重点研发计划(2021YFD1301205)

河南省科技攻关项目(212102110378)

河南省农业科学院自主创新项目(2022ZC43)

出版年

2023
农业生物技术学报
中国农业大学 中国农业生物技术学会

农业生物技术学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子:0.801
ISSN:1674-7968
参考文献量3
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