农业生物技术学报2023，Vol.31Issue(9) ：1980-1988.DOI:10.3969/j.issn.1674-7968.2023.09.018

基于农杆菌介导的茄子枯萎病菌遗传转化体系建立及GFP标记菌株的构建

Establishing of the Transformation System of Fusarium oxysporum f.sp.melongenae by Agrobacterium tumefaciens-mediated Transformation(ATMT)and Constructing of GFP Labeled Strain

严亚琴 胡天华 王五宏 胡海娇 魏庆镇 汪精磊 包崇来
农业生物技术学报2023，Vol.31Issue(9) ：1980-1988.DOI:10.3969/j.issn.1674-7968.2023.09.018
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基于农杆菌介导的茄子枯萎病菌遗传转化体系建立及GFP标记菌株的构建

Establishing of the Transformation System of Fusarium oxysporum f.sp.melongenae by Agrobacterium tumefaciens-mediated Transformation(ATMT)and Constructing of GFP Labeled Strain

严亚琴 1胡天华 1王五宏 1胡海娇 1魏庆镇 1汪精磊 1包崇来1
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作者信息

  • 1. 浙江省农业科学院蔬菜所研究所,杭州310000
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摘要

由尖孢镰刀菌茄子专化型(Fusarium oxysporum f.sp.melongenae)引起的茄子(Solanum melongena)枯萎病严重制约茄子的生产,其致病机制尚不明确.本研究以茄子枯萎病菌的分生孢子为转化受体,利用携带GFP表达载体pCAMsgfp的根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化茄子枯萎病菌,建立并优化了农杆菌介导的茄子枯萎病菌遗传转化体系.结果表明,当农杆菌光密度(optical density)值为0.5时,在200 μmol/L乙酰丁香酮诱导条件下,与浓度为1×106个/mL的病原菌分生孢子悬浮液等体积混合后,在共培养温度为25℃～28℃条件下共培养48h,茄子枯萎病菌的转化效率最高可达319±10.21个转化子/106个孢子.GFP的特异性引物PCR鉴定结果以及荧光观察表明GFP基因能够正常表达.本研究建立并优化了根癌农杆菌介导的茄子枯萎病菌的遗传转化体系,并获得了遗传稳定的GFP标记菌株,为病原菌与茄子互作的机制研究提供技术支撑.

关键词

茄子枯萎病/尖孢镰刀菌茄子专化型/农杆菌介导的遗传转化/GFP

Key words

Fusarium wilt/Fusarium oxysporum f.sp.melongenae/Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation/GFP

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基金项目

浙江省自然科学基金(LQ22C150007)

浙江省农业新品种选育科技重大专项(十四五)(2021C02065-1-3)

出版年

2023
农业生物技术学报
中国农业大学 中国农业生物技术学会

农业生物技术学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.801
ISSN：1674-7968
被引量1
参考文献量9
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