摘要
肌细胞增强因子2A(myocyte enhancer factor 2A,MEF2A)是肌细胞增强因子家族中的重要成员之一,在肌肉发生和再生过程中具有重要作用.本研究以关岭牛(Bos taurus)为实验材料,扩增MEF2A基因CDS区并构建过表达载体pEGFP-C1-MEF2A,分析MEF2A基因序列和蛋白结构,qRT-PCR检测MEF2A在不同阶段关岭牛多组织中的表达特性.同时将过表达载体转染至关岭牛成肌细胞,利用流式细胞仪与细胞生长分析仪探究过表达载体对成肌细胞增殖生长的影响.结果表明,MEF2A基因在3日龄牛与30月龄关岭牛的多组织中均可表达,表达量差异皆达到极显著水平(P＜0.01).过表达载体转染至细胞后,MEF2A基因表达量极显著上调(P＜0.01),肌细胞增强因子2B基因(myocyte enhancer factor 2B,MEF2B)、MEF2C与MEF2D表达量均极显著上调(P＜0.01);细胞周期蛋白依赖性激酶 2(cyclin-dependent kinase 2,CDK2)表达量差异不显著、细胞周期蛋白A2(cell cycle protein A2,CCNA2)表达量极显著上调(P＜0.01).与pEGFP-C1组相比,pEGFP-C1-MEF2A组细胞周期明显缩短,成肌细胞在6h后的增殖活性均极显著高于pEGFP-C1组(P＜0.01),表明MEF2A过表达载体转染至关岭牛成肌细胞后,可有效上调MEF2A基因表达,改变基因表达模式.本研究成功构建pEGFP-C1-MEF2A过表达载体,检测MEF2A基因对关岭牛肉质相关基因的表达影响,为进一步探究MEF2A基因对关岭牛肉质性状调控机制提供基础数据.
基金项目
国家自然科学基金(31571279)
教育部"促进与美大地区科研合作与高层次人才培养"项目([2015]2062号)
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