徐州工程学院学报2019，Vol.34Issue(2) ：26-34.

食源性致病菌生物芯片-RCA检测新方法

A New Method for Detecting Food-borne Pathogenic Bacteria by Biochip-RCA

李同祥 黄天姿 孙会刚 汤薇 田林 李文 张传丽 王春燕
徐州工程学院学报2019，Vol.34Issue(2) ：26-34.
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食源性致病菌生物芯片-RCA检测新方法

A New Method for Detecting Food-borne Pathogenic Bacteria by Biochip-RCA

李同祥 1黄天姿 1孙会刚 1汤薇 1田林 2李文 1张传丽 1王春燕1
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作者信息

  • 1. 徐州工程学院 食品(生物)工程学院,江苏 徐州 221018
  • 2. 徐州工程学院 化学化工学院,江苏 徐州 221018
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摘要

将生物芯片技术和滚环扩增(rolling circle amplification,RCA)技术结合,建立一种在片RCA检测食源致病性菌新方法.依据待检测致病菌的基因组序列设计捕获探针(capture probe,CP)、检测探针(detect probe,DP)和滚环探针(rolling circle probe,RCP),其中捕获探针、检测探针与待检测致病菌基因组序互补,RCP不含任何待检菌基因组DNA序列,CP的5′末端修饰氨基,将其点样制备成CP微阵列,DP、RCP与待检菌gDNA混合后变性,将其与CP微阵列杂交并连接,RCA扩增反应体系中加入链亲和素进行在片扩增反应,分析检测结果.研究表明,该方法能灵敏、特异性地检测单一和混合靶标分子,以金黄色葡萄球菌为检测对象,其最低检测限可到达50 fg/μL,其线性范围是400～50 fg/μL,R2达到0.97,证实了该方法的可行性和可靠性,为食源性致病菌检测提供了新的技术方法.

关键词

生物芯片/滚环扩增/致病菌/检测探针

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基金项目

江苏省重点研发计划项目(BE2016648)

江苏省高校自然科学研究重大项目(16KJA210001)

出版年

2019
徐州工程学院学报
徐州工程学院

徐州工程学院学报

影响因子：0.174
ISSN：1674-3571(社)
被引量1
参考文献量7
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