为管理限制牙膏中防腐剂的种类与用量,提升牙膏质量,研究利用高效液相色谱法测定牙膏中防腐剂的含量.用对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯以及苯甲酸等5种试剂制备防腐剂混合标准溶液,利用乙腈等溶液处理牙膏样本,采用高效液相色谱仪,以磷酸二氢钠溶液、甲醇与乙腈混合溶液为流动相,在柱温为室温,进样量为5μL,流速为1.5 mL/min的条件下测定混合标准溶液与牙膏样本,并根据混合标准溶液色谱峰的保留时间与面积绘制标准曲线.结果显示:流动相内磷酸二氢钠溶液、甲醇与乙腈体积比为55:25:20的条件下,混合标准溶液的分离度最高;各类防腐剂回收率范围为88.68%~99.61%之间,相对标准偏差范围为0.39%~2.44%之间;重复性测试结果满足实际应用需求.