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苹果树腐烂病菌丝氨酸蛋白酶基因VM1G_08720的功能分析

Functional Analysis of Serine Protease Gene VM1G 08720 in Valsa mali

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苹果是我国种植面积最广的温带水果之一,由苹果黑腐皮壳菌(Valsa mali)引起的苹果树腐烂病(Valsa canker of apple)是危害我国苹果树最为严重的病害之一.明确病原菌生长发育、响应环境胁迫及致病作用,解析病原菌的适应性及致病分子机制,有利于提出病害新的防控措施.本研究应用Double-joint PCR以及gap-repair方法获得基因VM1G_08720的缺失突变体和回补菌株.利用十字交叉法和伤口接种等方法,研究了基因4M1G_08720对病菌生长发育和致病性的影响.通过在PDA培养基中分别添加400pig/mL的荧光增白剂、200 μg/mL的刚果红、0.01％的SDS三种细胞壁干扰剂和0.5 M的NaCl、0.5 M山梨醇两种渗透胁迫因子,研究了该基因对病菌细胞壁完整性的维持及渗透胁迫的影响.通过设置不同pH的培养基,研究了基因VM1G_08720在不同pH下对病菌生长发育的影响.研究结果显示,与野生型sdaull-175相比,基因VM1G 08720缺失突变体在菌落颜色、菌丝致密度、生长速率无显著差异,分生孢子器产生数量减少;在含有200 μg/mL刚果红、0.01％SDS的培养基上,抑制率显著降低,在含有0.5MNaCl的培养基上的抑制率显著增加,而在含有400 μg/mL荧光增白剂和0.5 M山梨醇的培养基上,无显著差异;在pH为4-10时,生长速率显著降低,而在pH为11-12时,无显著性差异;在苹果果实和苹果枝条上的病斑大小无显著性差异,回补菌株均恢复到野生型水平.表明基因VM1G_08720在病菌分生孢子器的产生、酸碱度的响应、维持细胞壁完整性以及渗透胁迫方面发挥重要作用.

刁雨菲、熊雄、郑金柱、靳纪洋、于成明、刘会香

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山东农业大学植物保护学院/山东省林业有害生物防控工程技术研究中心,山东泰安271018

山东农业大学林学院,山东泰安271018

徂徕山林场,山东泰安271027

苹果树腐烂病菌 VM1G_08720基因 丝氨酸蛋白酶 表型分析

31770684ZR2017MC042

2022

10.3969/j.issn.1000-2324.2022.05.011

山东农业大学学报(自然科学版)
山东农业大学

山东农业大学学报(自然科学版)

CSTPCD北大核心
影响因子：0.565
ISSN：1000-2324
年,卷(期)：2022.53(5)
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