摘要
为制备鸡源宿主限制因子SAMHD1(chSAMHD1)的多克隆抗体,本试验根据chSAMHD1基因序列设计引物,扩增部分chSAMHD1 片段,构建pET-chSAMHD1 原核表达质粒,并将其转化至BL21(DE3)大肠杆菌,经IPTG诱导和镍柱亲和层析纯化获得重组chSAMHD1 蛋白.将重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备抗chSAMHD1 多克隆抗体,通过Western blot和IFA测定多克隆抗体的反应性.结果显示,chSAMHD1 重组蛋白的相对分子质量约为 75.0 kDa,与预期大小一致;重组蛋白以包涵体形式表达;所制备的chSAMHD1 多克隆抗体效价达到 1:512 000;IFA结果证实,本试验所制备多克隆抗体能够特异性识别DF-1 细胞中过表达的chSAMHD1 蛋白.以上结果表明,该研究成功制备了chSAMHD1 蛋白多克隆抗体,从而为鸡源SAMHD1 蛋白功能的深入研究奠定了基础.
基金项目
山东省自然科学基金面上项目(ZR2019MC045)
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