为了建立区分鸭圆环病毒两种基因型的双重PCR方法,试验针对Ducv-1、Ducv-2 两种基因型参考序列的Cap基因,设计特异性引物,并对该双重引物进行特异性、敏感性、重复性等试验.结果显示,试验可以特异性地扩增出鸭圆环病毒1 型(700 bp)和鸭圆环病毒 2 型(1080 bp)毒株的目的条带.该方法仅对鸭圆环病毒 1型和 2型检测为阳性,对鸭圆环病毒两种基因型的检测限分别为4.20×103 copies/uL和 4.00×103 copies/uL.使用该双重引物进行重复性检测,结果一致,重复性较好.使用建立的该鸭圆环病毒不同基因型鉴定方法对实验室收集的疑似鸭圆环病毒阳性样品进行鉴别诊断,结果显示 5 份样品在 700 bp处出现明亮条带,属于圆环病毒 1 型,另外 1 份为阴性.本研究建立的双重PCR方法可用于市场上鸭圆环病毒两种基因型的鉴别诊断,为鸭圆环病毒病的诊断提供参考.
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