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基于重组牛病毒性腹泻病毒囊膜糖蛋白E2的间接ELISA检测方法建立

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为建立一种检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗体的间接ELISA方法,本试验将纯化后的重组BVDV E2 蛋白作为抗原包被 96 孔酶标板,采用方阵滴定法优化间接 ELISA 的各项反应参数初步建立检测方法,并进一步分析了该方法的特异性、敏感性和重复性.确定的最佳 ELISA 反应条件如下:抗原包被浓度为 1.5 μg/mL,1:100 稀释待检血清于 37℃孵育1 h,1:6 000 稀释辣根过氧化物酶标记的兔抗牛IgG于 37℃作用1 h,确定阴、阳性血清临界OD450 nm值分别为 0.203 和 0.226.本研究建立的检测BVDV血清抗体的间接ELISA方法特异性强、敏感性高、重复性好,与商品化试剂盒的检测符合率达 96%,该方法可以用于BVDV抗体的检测和试剂盒的进一步研制.

彭勇、张程、韩铮

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牛病毒性腹泻-黏膜病 牛病毒性腹泻病毒 囊膜糖蛋白E2 间接ELISA

2024

山东畜牧兽医
山东畜牧兽医学会 山东农业大学

山东畜牧兽医

影响因子:0.123
ISSN:1007-1733
年,卷(期):2024.45(9)
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