摘要
为建立一种检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗体的间接ELISA方法,本试验将纯化后的重组BVDV E2 蛋白作为抗原包被 96 孔酶标板,采用方阵滴定法优化间接 ELISA 的各项反应参数初步建立检测方法,并进一步分析了该方法的特异性、敏感性和重复性.确定的最佳 ELISA 反应条件如下:抗原包被浓度为 1.5 μg/mL,1:100 稀释待检血清于 37℃孵育1 h,1:6 000 稀释辣根过氧化物酶标记的兔抗牛IgG于 37℃作用1 h,确定阴、阳性血清临界OD450 nm值分别为 0.203 和 0.226.本研究建立的检测BVDV血清抗体的间接ELISA方法特异性强、敏感性高、重复性好,与商品化试剂盒的检测符合率达 96%,该方法可以用于BVDV抗体的检测和试剂盒的进一步研制.
NETL
NSTL
万方数据