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花生RGA-SSCP实验条件的优化

Optimization of RGA-SSCP System for Peanut

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单链构象多态性(SSCP) 技术是一种简便、灵敏的多态性检测方法,近年在植物研究中得到了较多应用.为了检测花生品种间抗病基因同源序列(RGA)的单核苷酸差异,对影响花生RGA-SSCP的电泳温度、电压、胶浓度、交联度、变性剂等因素进行了优化.结果表明,碱变性后的PCR产物(PCR产物与碱变性剂比例1∶2)在不加甘油的8%非变性聚丙烯酰胺凝胶(交联度为29∶1)、1×TBE电泳缓冲液、恒温4℃和600 V条件下电泳5 h为最佳优化组合.用上述优化方法分析了抗、感北方根结线虫病的亲本及F2群体部分单株,获得了电泳条带细而清晰的SSCP图.该体系的建立对RGA-SSCP标记用于花生基因定位、遗传图谱构建、标记辅助选择等具有重要意义.

漆燕、李双铃、袁美、王辉、任艳、石延茂、崔富华、李加纳、禹山林

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山东省花生研究所/国家花生工程技术研究中心,山东,青岛,266100

南充市农业科学研究所,四川,南充,637000

西南大学农学与生物科技学院,重庆,400716

花生 RGA-SSCP 优化 分子标记

国家自然科学基金青岛科技发展计划国家高技术研究发展计划(863计划)山东省农业科学院创新基金

3070050908-1-3-23-jch2006AA1001062007YCX013

2010

山东农业科学
山东省农业科学院,山东农学会,山东农业大学

山东农业科学

CSTPCD
影响因子：0.578
ISSN：1001-4942
年,卷(期)：2010.(6)
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