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特利波契巴尔通体基因敲除体系的建立

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本研究旨在建立基于同源重组技术的特利波契巴尔通体基因敲除方法.研究通过扩增并融合Ⅳ型分泌系统VirB4基因的上下游同源片段,将同源片段与pJM05质粒进行体外拼接,并将pJM05-△VirB4质粒转化进入S17-1大肠杆菌中;通过双亲接合转移将大肠杆菌S17-1中的pJM05-△VirB4质粒转移到特利波契巴尔通体中进行同源臂交换,产生单交换菌株;随后利用质粒中sacB基因表达产物分解蔗糖对自身产生毒性作用,在蔗糖平板中筛选出22个双交换菌株,通过菌落PCR及测序验证,共确定出6个VirB4基因框内缺失菌株;并且测序结果表明这6个菌株在VirB4基因框内缺失了2 136 bp.
Establishment of in-frame deletion mutant of Bartonella tribocorum

杜玉明、蔡雨豪、王蒙、袁聪俐

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上海交通大学农业与生物学院,上海200240

特利波契巴尔通体 VirB4基因 pJM05质粒 sacB蔗糖筛选

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2016MH23717Z1280100072017JZ001017Z1170010018

2019

上海交通大学学报(农业科学版)
上海交通大学

上海交通大学学报(农业科学版)

CSTPCD
影响因子:0.63
ISSN:1671-9964
年,卷(期):2019.37(1)
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