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模块化质粒系统用于水稻条斑病菌基因表达的分析

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水稻条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola,Xoc)侵染水稻,引起细菌性条斑病(bacterial leaf streak,BLS).近几年,在我国南方水稻产区,条斑病大面积发生,对水稻的安全生产构成严重威胁.为了准确地在Xoc中进行基因功能的分析,本研究设计出模块化的质粒系统,用于基因转录表达和蛋白表达的分析.为了验证该系统的可行性,选取hrpG、hrpX和hrpB1基因构建了相应的启动子载体和蛋白表达载体,将这些载体导入相应的hrp调控子基因trh、hrpG和hrpX的突变体中.GUS活性测定的结果显示,在XOM3培养基、寄主水稻组织和非寄主烟草组织中,启动子模块元件能够准确反映这3个hrp基因的调控表达模式.蛋白免疫杂交结果显示,HrpX蛋白表达水平反映的调控模式与hrpX启动子活性呈现的调控表达模式一致.水稻上致病性测定结果显示,有效表达的HrpG蛋白能够恢复hrpG突变体在寄主水稻上的致病性.这表明,这套模块化的栽体系统能够有效应用于基因转录表达、蛋白表达和功能互补的分析.这将为Xoc-水稻互作研究提供有效的技术支持,加快Xoc毒性相关基因功能的研究.
A modular plasmid system for expression analysis of genes in Xanthomonas oryzae pv.oryzicola

杨小菲、李逸朗、吾尼尔别克·美丽、张翠萍、杨瑞环、李生樟、李映斌、陈晓斌、陈功友、邹丽芳

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上海交通大学农业与生物学院,上海200240

水稻条斑病菌 hrp基因 启动子探针载体 蛋白表达载体

国家重点研发计划国家自然科学基金国家自然科学基金

2017YFD02004003147023531772122

2019

上海交通大学学报(农业科学版)
上海交通大学

上海交通大学学报(农业科学版)

CSTPCD
影响因子：0.63
ISSN：1671-9964
年,卷(期)：2019.37(3)
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