摘要
为优化重组毕赤酵母表达PCV2 Cap的纯化工艺和筛选佐剂.对破碎压力、循环次数、PEG相对分子质量、PEG终质量分数、pH和NaCl浓度进行筛选,用BCA(bicinchoninic acid)法测定PCV2 Cap质量浓度,并用电镜负染法观察纯化后PCV2 Cap颗粒.分别用国产白油、MONTANIDETM IMS 2215 VG ST和ISA206 VG配制PCV2 Cap佐剂疫苗,测定免疫小鼠血清中的抗体水平.结果显示:高压均质仪设定130 MPa、破碎循环2次,酵母细胞破碎率达89.74%;PEG纯化PCV2 Cap的优化条件为5%(终质量分数)PEG6000、pH 7.5、0.20 mol/L NaCl,PCV2 Cap回收率可达91%,电镜下观察PCV2 Cap颗粒完整;MONTANIDETM IMS 2215 VG ST PCV2 Cap佐剂疫苗接种小鼠后,抗体水平最高,可达1∶5 120.
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