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牛源多杀性巴氏杆菌与支原体双重PCR检测方法的建立

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为建立一种快速、准确、简便的多杀性巴氏杆菌与牛支原体双重PCR检测方法,参照GenBank中多杀性巴氏杆菌kmt1基因序列和牛支原体oppD/F基因序列设计2对引物,以2种病原的单重PCR的扩增体系和条件为基础,对双重PCR的退火温度、引物用量、模板用量进行优化,分析所建立的双重PCR方法的特异性、敏感性和重复性,并将其应用于屠宰场273份疑似多杀性巴氏杆菌、牛支原体感染牛的肺脏组织样品验证.结果表明:所建立的双重PCR检测方法对多杀性巴氏杆菌和牛支原体具有特异性;双重PCR体系混合质粒的最低检测质量浓度为1.25×10-6 ng/µL,敏感性高;间隔2周的2次检测结果一致,重复性好;273份屠宰场样品的双重PCR检测结果与单重PCR检测结果符合率为100%.

冯明祥、姜玲玲、周景瑞、冉江、余波、李蓉蓉

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贵州省关岭自治县畜牧服务中心,贵州 安顺 561300

贵州省农业科学院畜牧兽医研究所,贵州 贵阳 550005

贵州省师范学院,贵州 贵阳 550018

多杀性巴氏杆菌 牛支原体 双重PCR 检测

贵州省农科院项目贵州省农业农村厅项目贵州省科技厅项目

黔农科种质资源[2023]04GZCYTX-0302黔科合支撑[2023]一般021

2024

上海畜牧兽医通讯
上海市农业科学院畜牧兽医研究所

上海畜牧兽医通讯

影响因子：0.261
ISSN：1000-7725
年,卷(期)：2024.(2)
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