本研究旨在探究不同冷冻-解冻程序对浦东鸡囊胚细胞(blastodermal cells,BCs)冷冻保存效果的影响.以浦东鸡BCs为研究对象,比较了不同冷冻-解冻程序下细胞解冻后培养24 h的活率和贴壁率.经综合分析,鸡BCs最佳的冷冻方法为:以20%二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)+20%胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)+60%DMEM(dulbecco's modified eagle medium)为冷冻保护液,通过应用程序冷冻仪,在4℃条件下以0.7℃/min降温速率,降温至—7℃保持10 min,以1.0℃/min速率降温至—35℃,之后投入液氮保存.最佳的解冻方法为:在37℃水浴锅中解冻30 s,培养24 h后鸡BCs的质量最佳.本研究优化了浦东鸡BCs冷冻保存技术,为家禽种质资源保存工作提供一定参考.
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