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毕赤酵母中tRNACCGPro基因的表达及其作用效果

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转运核糖核酸(tRNA)是蛋白质合成过程中重要参与成分之一,为了探索稀有密码子对应的tRNA(稀少tRNA)丰度改变对外源基因表达量的影响,文中构建了毕赤酵母稀少tRNA基因与外源基因共表达体系.首先在GFP基因中添加由4个连续脯氨酸稀有密码子CCG组成的阻遏区,结果显示该GFP基因的表达量明显降低.然后将带有阻遏区的GFP基因和tRNACCGPro基因顺次连接于pPIC9K载体上,在毕赤酵母GS115中共表达,结果使GFP表达量提高了4.9%;另将带有阻遏区的GFP基因和tRNACCGPro基因分别连接于pPIC9K和pFLDα载体,在毕赤酵母GS115中共表达,GFP表达量最高提高了12.5%;应用同样方式将tRNACCGPro基因与NFATc3T-GFP融合基因共表达,其表达量提高了21.3%.可见,tRNACCGPro在毕赤酵母GS115中确为稀少tRNA,通过共表达tRNACCGPro基因可显著提高带有连续该密码子的外源基因表达量,并且,文中构建的共表达体系将同样适用于其他稀少tRNA基因的筛选和验证.
Expression of Pichia pastoris tRNACCGPro and its function

彭梦、谭明、曾艳、郑宏臣、宋诙

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天津科技大学,天津300457

中国科学院天津工业生物技术研究所,天津 300308

毕赤酵母 稀少tRNA丰度 tRNACCGPro基因 共表达

国家自然科学基金中国科学院重点部署项目中国科学院重点部署项目天津市科技计划项目天津市科技计划项目天津市科技计划项目

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2019

生物工程学报
中国科学院微生物研究所 中国微生物学会

生物工程学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子:0.641
ISSN:1000-3061
年,卷(期):2019.35(1)
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