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一株针对H7N9亚型禽流感病毒血凝素蛋白茎部的单克隆抗体的表征

Characterization of a monoclonal antibody against the hemagglutinin stem of H7N9 subtype avian influenza virus

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流感病毒血凝素蛋白(hemagglutinin,HA)的茎部区相对保守,是广谱疫苗、抗体与病毒检测制剂的重要靶点.前期研究获得了一株与H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白茎部多肽(aa 428-452)反应的单克隆抗体(5D3-1B5).为系统评价其生物学特性,本研究测定了5D3-1B5的抗体效价(IgG、血凝抑制与病毒中和滴度),鉴定了抗体识别的抗原表位与编码基因的序列及结构,并评价了抗体与不同亚型流感病毒的交叉反应性.结果 显示,5D3-1B5不具有针对H7N9病毒的血凝抑制与病毒中和活性,但是与HA蛋白的反应性较强;基于多肽的酶联免疫吸附试验与噬菌体表面展示随机多肽文库筛选的方法,鉴定了5D3-1B5识别的表位是位于HA茎部C螺旋区的431W-433Y-437L基序,且含有该表位突变的重组H7N9病毒失去了与抗体的反应性;测定了抗体可变区的基因序列并定位了轻链与重链可变区的互补决定区;抗体可变区的结构模拟与分子对接则验证了抗体与HA蛋白茎部C螺旋区的结合;值得注意的是,5D3-1B5与group 1和2不同亚型的流感病毒具有广谱反应性.因此,5D3-1B5具有作为流感病毒广谱检测与抗体治疗制剂的应用潜力,研究结果也为认识H7N9亚型禽流感病毒HA蛋白的抗原表位特征提供了新的信息.

赵江艳、朱颜笑、胡娇、胡增垒、刘秀梵

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扬州大学农业农村部畜禽传染病学重点开放实验室,江苏扬州225009

扬州大学江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州225009

扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室,江苏扬州225009

扬州大学教育部农业与农产品安全国际联合实验室,江苏扬州225009

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禽流感病毒 血凝素蛋白茎部 单克隆抗体 抗原表位 交叉反应性

国家重点研发计划江苏省人兽共患病学重点实验室开放基金现代农业产业技术体系建设项目专项江苏高校优势学科建设工程项目(PAPD)

2016YFD0501601R1808CARS-40

2022

生物工程学报
中国科学院微生物研究所 中国微生物学会

生物工程学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子:0.641
ISSN:1000-3061
年,卷(期):2022.38(1)
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