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环糊精葡萄糖基转移酶182位点定点改造催化合成糖基化染料木素

Engineering the 182 site of cyclodextrin glucosyltransferase for glycosylated genistein synthesis

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染料木素及其单糖苷衍物在食品和医药领域具有重要作用,但难溶于水的特性极大地限制了其应用范围,研究表明糖基化反应可有效提高其水溶性.文中针对来源于软化芽孢杆菌的环糊精葡萄糖基转移酶,研究其对染料木素单糖苷衍生物槐角苷的糖基化反应.通过对D182位点的定点饱和突变,突变酶D182C较WT转化率提高了13.42％,主要糖基化产物(槐角苷单糖苷、二糖苷、三糖苷)分别提高了39.35％、56.05％和64.81％.酶学性质研究发现,D182C较WT的环化、水解、歧化活力均有所提高.且最适pH和温度分别为6和40℃.动力学研究发现,D182C针对底物(糖基供体和受体)的Km值较WT均有所降低,且催化效率kcat/Km则明显提高,说明D182C对底物的亲和力相较于WT有大幅提升.同源建模及分子对接结果表明,突变酶D182C糖基化效率提高的原因可能与底物作用力增加有关.

柴宝成、姜钰琳、倪晔、韩瑞枝

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江南大学生物工程学院,江苏无锡214122

江南大学工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡214122

染料木素 槐角苷 环糊精葡萄糖基转移酶 水溶性 定点饱和突变 糖基化反应

国家重点研发计划国家自然科学基金国家自然科学基金

2021YFC21027003187173821776112

2022

10.13345/j.cjb.210144

生物工程学报
中国科学院微生物研究所 中国微生物学会

生物工程学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.641
ISSN：1000-3061
年,卷(期)：2022.38(2)
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