生物工程学报2022，Vol.38Issue(3) ：1159-1172.DOI:10.13345/j.cjb.210356

多囊蛋白2对低频脉冲电磁场促进成骨细胞分化成熟的影响

Effect of polycystin2 on differentiation and maturation of osteoblasts promoted by low-frequency pulsed electromagnetic fields

何玥颖 杨明俊 陈卓 魏朋 秦昆 谢高倩 陈克明
生物工程学报2022，Vol.38Issue(3) ：1159-1172.DOI:10.13345/j.cjb.210356
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多囊蛋白2对低频脉冲电磁场促进成骨细胞分化成熟的影响

Effect of polycystin2 on differentiation and maturation of osteoblasts promoted by low-frequency pulsed electromagnetic fields

何玥颖 1杨明俊 2陈卓 3魏朋 3秦昆 3谢高倩 3陈克明4
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作者信息

  • 1. 兰州理工大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730050;解放军联勤保障部队第940医院基础医学实验室,甘肃兰州730050
  • 2. 兰州理工大学生命科学与工程学院,甘肃兰州730050
  • 3. 解放军联勤保障部队第940医院基础医学实验室,甘肃兰州730050
  • 4. 解放军联勤保障部队第940医院基础医学实验室,甘肃兰州730050;甘肃省干细胞与基因药物重点实验室,甘肃兰州730050
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摘要

已知低频脉冲电磁场(pulsed electromagnetic fields,PEMFs)可以促进体外培养大鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROBs)的分化成熟,但ROBs感知PEMFs物理信号并启动成骨性分化的机制至今不明.本研究探究了0.6 mT 50 Hz PEMFs促进ROBs成骨性分化与位于ROBs表面的初级纤毛上的多囊蛋白2(polycystin2,PC2)的关系.首先用免疫荧光染色法研究了PC2是否位于ROBs初级纤毛内,然后通过Western blotting检测了经PEMFs处理不同时间后,ROBs内PC2蛋白表达的变化情况.接着用PC2阻断剂盐酸阿米洛利(amiloride HCl,AMI)预处理ROBs,检测碱性磷酸酶(alkline phosphatase,ALP)活性和PC2蛋白表达受PEMFs处理的影响情况,以及与骨形成相关的Runx-2、Bmp-2、Col-1、Osx的蛋白及基因表达的变化情况.再用RNA干扰法抑制ROBs内PC2的表达后,检测与骨形成相关基因表达情况.结果发现,PC2被定位于ROBs初级纤毛上,PEMFs处理增加了 PC2蛋白表达量.PC2被AMI阻断后,PEMFs不再能提高PC2蛋白表达水平及ALP活性,PEMFs对成骨相关蛋白和基因表达的促进作用也被抵消.使用RNA干扰法抑制PC2的表达后,PEMFs也不再能提高骨形成相关基因的表达.结果表明:存在于成骨细胞初级纤毛表面的PC2在感知并传递PEMFs发出的物理信号中扮演着不可或缺的角色,PEMFs促进ROBs成骨性分化依赖于PC2的存在.本研究为阐明低频脉冲电磁场促进骨形成及治疗骨质疏松的机制研究奠定了基础.

关键词

多囊蛋白2/低频脉冲电磁场/成骨细胞/盐酸阿米洛利/RNA干扰

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基金项目

国家自然科学基金(81770879)

甘肃省青年科技基金(20JR5RA589)

出版年

2022
生物工程学报
中国科学院微生物研究所 中国微生物学会

生物工程学报

CSTPCDCSCD北大核心
影响因子：0.641
ISSN：1000-3061
参考文献量7
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